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※<原理>
种子萌发过程中贮藏物质的动员 ，需要在一系列酶的催化作用下才能进行 。这些酶有的已经存在于干燥种子中 ，有的需要在种子吸水后重新合成。种子萌发过程中淀粉的分解主要是在淀粉酶的催化下完成的 。淀粉酶在植物中存在多种形式，包括α-淀粉酶、β-淀粉酶等 。β-淀粉酶已经存在于干燥种子中 ，而α-淀粉酶不存在或很少存在于干燥种子中 ，需要在种子吸水后重新合成。实验证明，启动α-淀粉酶合成的化学信使是赤霉素 。萌发的大麦种子的胚产生赤霉素扩散到胚乳的糊粉层中，刺激糊粉层细胞内α-淀粉酶的合成 。合成的淀粉酶进入胚乳 ，将胚乳内贮藏的淀粉水解成还原糖。因此 ，没有胚释放赤霉素的活动，α-淀粉酶就不能合成。外加的赤霉素可以代替胚的释放作用 ，从而诱导α-淀粉酶的合成 。这个极其专一的反应被用来作为赤霉素的生物鉴定法 。在一定范围内 ，由去胚的吸胀大麦粒所产生的还原糖量，与外加赤霉素浓度的对数成正比。根据淀粉可与
I2
-KI显蓝色 ，而淀粉分解的产物还原糖不能与I2-KI显色的原理 ，可以定性和定量地分析α-淀粉酶的活性 。
5
※<实验材料 、试剂与仪器设备>
（一）实验材料
大麦（或小麦）种子 。
（二）试剂
1.1％次氯酸钠溶液。
2 、0.1%淀粉溶液：取1g淀粉和8.16g
KH2PO4，用蒸馏水配制成1000mL溶液 。
3、2×10-5mol/L赤霉素溶液：称取
GA3
6.8mg放入烧杯中 ，加少量95%酒精使其溶解 ，移入1000mL容量瓶中，加水定容至刻度 。然后再稀释成2×10-6mol/L 、2×10-7mol/L和2×10-8mol/L三种浓度的赤霉素溶液。
4 、10-3mol/L醋酸缓冲液(pH4.8）：取2mL
0.2mol/L的醋酸(11.55mL冰醋酸稀释至1000mL)、3mL
0.2
mol/L的醋酸钠(16.4g无水醋酸钠配成1000mL)和1g链霉素 ，定容至000mL ，每mL缓冲液中含链霉素1mg 。
5 、I2-KI溶液：取0.6gKI和0.06gI2溶于1000mL0.05mol/L的HCl中 。
(三)
仪器设备
分光光度计，恒温振荡器，水浴锅 ，2mL移液管1支 ，50mL烧杯2只，试管6支 ，青霉素小瓶6个 ，镊子1把，刀片。
5
※<实验步骤>
1.
取样
选取大小一致 、完好的大麦或小麦种子50粒 ，用刀片将每粒种子横切成有胚和无胚的半粒 ，分装于2个烧杯中 。
2.
表面消毒
向2个烧杯中加入1％次氯酸钠溶液，以浸没种子为度 。消毒
15min后 ，用无菌水冲洗3次 ，备用。
3.
处理浓度
将6只青霉素小瓶编号后，按表40-1加入溶液和材料。溶液混匀后 ，1～6号小瓶中赤霉素的最终浓度分别为：0、0、2×10-5 、2×10-6 、2×10-7和2×10-8mol/L 。将青霉素小瓶置于恒温振荡器中于25℃下振荡培养24h 。
表
40-1
处理浓度及方法
青霉素小瓶编号
赤霉素溶液
醋酸缓冲液(mL)
实验材料
浓度(mol/L)
mL
1
0
1
1
10个无胚半粒
2
0
1
1
10个有胚半粒
3
2×10-5
1
1
10个无胚半粒
4
2×10-6
1
1
10个无胚半粒
5
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